說 明 書 產品名稱：FDA-PI 雙染細胞活力檢測試劑盒（200T） 

產品簡介：FDA-PI 雙染細胞活力檢測試劑盒是專門用于檢測細胞活性的雙染色試劑盒。 

產品特點：

二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate, 簡稱 FDA），是一種非熒光的疏水熒光素衍生物， 能主動擴散進入細胞膜（包括哺乳動物細胞和細菌細胞），一旦進入細胞，經胞內酯酶水解二乙 酸基團生成強熒光產物熒光素（Ex/Em=495/520 nm，發綠色熒光）。

此熒光素累積在含完整細 胞膜的細胞內，從而用作細胞活力的指示標志物。而不具有完整細胞膜或缺乏活力代謝的細胞都 無法聚集此熒光素，從而不會呈綠色熒光。 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB） 的類似物，能夠嵌入堿基之間實現與 DNA 結合。這種結合沒有或者幾乎無序列傾向性，大約每 4-5 個 DNA 堿基對結合一個染料。PI 也能與 RNA 結合，需要用核酸酶處理來區分 DNA 和 RNA 染色。水溶液中 PI 的最大激發/發射波長是 493/636 nm。一旦與核酸結合，熒光信號明顯增強 20-30 倍，最大激發波長向紅色波段遷移~30-40 nm，最大發射波長向藍色波段遷移~15 nm，從 而使其最大激發/發射波長變為 535/617 nm。PI 的摩爾吸光系數相對比較低，但是其具有足夠大 的斯托克司頻移來同時檢測核酸 DNA 和熒光標記抗體，只需要使用恰當的濾片。PI 適用于熒光 顯微鏡，共聚焦顯微鏡，流式細胞儀以及熒光計分析。 

PI 不能穿透細胞膜而被排斥在活細胞外，但是可以穿過破損的細胞膜而對核染色。利用這 一特性，通常與 Calcein-AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等活細胞熒光探針一起使用， 同時對活細胞和死細胞染色和鑒定，用于細胞凋亡相關的研究。也可以用作多重熒光染色的復染 劑，兼容于各種細胞標記技術，包括直接或者間接的熒光抗體檢測，mRNA 原位雜交，細胞結 構特異性的熒光探針檢測法以及組織染色。PI 的單獨染色也可以進行細胞周期的檢測。

FDA 可能與碘化丙啶（PI）共染色，因死細胞能攝取 PI，細胞被染成紅色；而活細胞不能 攝取 PI，只能被染成綠色。這一雙色分離死細胞和活細胞的方法比單色染色提供了一種相對更 精確的活細胞定量分析。

產品組成： 

FDA 溶液：二乙酸熒光素（FDA），丙酮（acetone）。濃度：10 μg/mL； 

PI 溶液：碘化丙啶（PI），DPBS。濃度：500 μg/mL。 

產品使用：

該產品在胰島活性檢測中的使用方法：

取含胰島的組織溶液 0.5 mL，加入 10 μL FDA，再加入 10 μL PI，稍混勻后避光室溫下 靜置染色 30 s 左右，在熒光顯微鏡下觀察細胞染色情況，綠色激發光使死亡的細胞發出紅色熒 光，藍色的激發光使活細胞發出綠色熒光；可在綠色激發光下估算紅色細胞占整個細胞團中的比 例；一般計數 50 個胰島細胞團的活性，取其平均值±SD，即為胰島活性。 

產品規格：

FDA 溶液：2 mL/瓶 PI 溶液：2 mL/瓶 

保存條件：

棕色玻璃瓶包裝。-20℃保存，保質期 6 個月。日常使用期間，可存放于 4℃保存。 

本產品僅用于科學研究